CNKI:46-1049/R.20110426.1143.015
CBP基因沉默抑制血管平滑肌细胞增殖的研究
目的:探讨RNA干扰大鼠CREB结合蛋白(rCBP)基因对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响.方法:根据CBP cDNA序列构建可同时表达4条针对rCBP mRNA特异的短发夹RNA(shR-NA)、携带绿色荧光蛋白的腺病毒(CBP-shRNA/Ad).以空腺病毒为转染对照组、含非特异性shRNA编码序列的腺病毒为阴性对照组、感染复数为12、16、25、50的CBP-shRNA/Ad为干预组,转染0.1 U/mL凝血酶预处理的VSMCs 2 d.RT-PCR法、蛋白印记法分别检测rCBP mRNA和蛋白质的表达变化.流式细胞技术检测细胞周期,评价细胞增殖能力.倒置显微镜观察CBP-shRNA/Ad对细胞的毒副作用.结果:不同剂量的CBP-shRNA/Ad可在mRNA和蛋白质水平,明显抑制凝血酶诱导CBP高表达(P<0.05),具有量效依赖性.CBP-shRNA/Ad通过下调CBP含量,可使G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05),S期细胞比例下降(P<0.05),细胞周期被阻滞.倒置显微镜观察细胞贴壁状况良好.结论:RNA干扰技术可通过选择性下调rCBP的表达,显著抑制VSMCs的增殖,无明显细胞毒性.
血管平滑肌细胞、RNA干扰、环磷腺苷反应原件结合蛋白结合蛋白、基因治疗
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R543;R34(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金资助项目30770849
2015-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
433-437,444