四种微量石蜡组织DNA提取方法的比较
目的:探讨从微量福尔马林固定石蜡包埋组织(formalin fixation and paraffin embedded tissues,FFPET)中提取DNA的简单而高效的方法.方法:采用Chelex-100提取法、酚氯仿抽提法、单纯消化法、水煮法4种方法提取组织DNA;应用聚合酶链反应扩增100~500 bp长度DNA片段,然后进行电泳分析,1年后重复PCR电泳分析.结果:小于200 bp长度DNA片段扩增,Chelex-100提取法、单纯消化法阳性率分别为88.8%、78.8%,明显优于酚氯仿抽提法(15.0%)(P<0.01)及水煮法(21.3%)(P<0.01).随着扩增长度的增加,PCR扩增效率逐渐降低,Chelex-100提取法PCR反应总阳性率为82.5%,单纯消化法为66.5%,水煮法为13.4%,酚氯仿抽提法为13.4%.1年后重复PCR总阳性率分别为80.1%、31.7%、2.5%、9.2%.结论:Chelex-100提取法方便简单,适用于微量石蜡组织DNA扩增分析;单纯消化法及水煮法在一定条件下适用于微量石蜡组织短片段DNA的扩增.
石蜡组织、DNA提取、Chelex-100提取法
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R361.2(病理学)
海南省教育厅基金项目HJK200749
2015-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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