10.3969/j.issn.1003-6350.2021.21.003
miR-222在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖与迁移的影响
目的 探究miR-222在膀胱癌与癌旁组织中的表达差异,并且初步探讨其对膀胱癌细胞增殖、迁移能力及凋亡的影响.方法 选取2018年1月至2019年6月在上海市松江区中心医院确诊并手术的45例膀胱尿路上皮癌患者,留取癌组织标本及配对癌旁组织,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测两者中miR-222的表达情况;脂质体瞬时转染miR-222 mimics、miR-222 inhibitor及miR-222 inhibitor NC至膀胱癌T24细胞,以空白T24细胞为对照组,通过MTT法、Transwell迁移实验、流式细胞术检测miR-222对T24细胞增殖、迁移能力及凋亡情况的影响;采用双荧光素酶报告基因检测验证miR-222的靶基因,Western blot分析miR-222假定靶基因CDKN1B的表达水平,并通过免疫组化检测膀胱癌及癌旁组织中的p27蛋白表达的差异.结果 miR-222在膀胱癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);体外细胞实验结果显示,与对照组相比,上调miR-222能提高膀胱癌细胞增殖能力和加快细胞迁移速率,并抑制癌细胞凋亡,差异均有统计学意义(P<0.05);下调miR-222能抑制膀胱癌T24细胞的增殖、迁移能力并诱导细胞凋亡,差异均有统计学意义(P<0.05);荧光素酶报告基因检测结果表明miR-222可以靶向调控CDKN1B基因的表达,Western bolt结果证实上调miR-222后膀胱癌T24细胞中CDKN1B(p27)表达水平明显下降,免疫组化染色结果证实膀胱癌组织中CDKN1B低表达,进一步印证了miR-222对CDKN1B的负调控作用.结论 miR-222在膀胱癌组织中表达明显上调,其在体外可促进膀胱癌细胞的增殖及迁移,抑制癌细胞凋亡;其机制可能与靶向调控CDKN1B的表达有关,有望成为膀胱癌检测的分子标记物和治疗靶点.
膀胱癌;miR-222;细胞增殖;细胞迁移;细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B
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R737.14(肿瘤学)
上海市松江区科委科技攻关项目编号:15sjgg49
2021-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
2730-2735