顺铂处理的肺癌细胞NSUN2 mRNA剪接异构体变化

摘要：

目的:探讨顺铂(CDDP)处理肺癌细胞后NSUN2 pre-mRNA的剪接变化.方法:在NSUN2基因的pre-mRNA有选择性剪接的外显子两侧的外显子上设计检测引物,选取16例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测组织NSUN2各mRNA剪接异构体的表达;取人肺癌细胞系A549细胞和H1299细胞分别用不同浓度CDDP处理,A549细胞分为0、8、16、24、32、40、48及56μmol/L组,H1299细胞分为0、12、24、36、48、60、72及84μmol/L组,采用RT-PCR检测各组细胞NSUN2各mRNA剪接异构体的表达;RT-PCR产物胶回收后进行TA克隆测序并与NCBI网站数据库中NSUN2的序列进行比对分析.结果:人肺癌细胞系A549细胞和H1299细胞及肺癌临床样本中NSUN2基因可编码蛋白的mRNA剪接异构体表达量最高,占主导地位;随着CDDP浓度增加,NSUN2可编码蛋白的异构体在H1299细胞的高浓度组中的表达下降(P<0.01),非编码蛋白的异构体在A549细胞和H1299细胞的高浓度组中表达均上升(P<0.05);检测到2种未见报道的mRNA剪接异构体.结论:CDDP处理后肺癌细胞中NSUN2 pre-mRNA剪接会发生变化,NSUN2基因的表达存在pre-mRNA选择性剪接调控.

关键词：选择性剪接、顺铂、肺肿瘤、5-甲基胞嘧啶RNA甲基化、NOP2/Sun RNA甲基转移酶2、mRNA剪接异构体

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分类号：R34;Q752(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新基金资助项目CIFMS,2016-I2M-2-001

在线出版日期：2020-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1164-1171