橙皮素对PDGF-BB诱导的大鼠原代胸主动脉VSMCs表型转化的影响

摘要：

目的:探讨橙皮素(HES)对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响.方法:4周龄健康雄性SD大鼠1只,5％水合氯醛麻醉后,采用组织块贴壁法提取大鼠胸主动脉原代VSMCs并培养,取对数生长期细胞,采用细胞免疫荧光化学法鉴定VSMCs平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA),采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测2、5、10、25及50μg/L PDGF-BB和10、50、100、150、200、250及300μmol/L的HES对VSMCs增殖活性的影响,筛选PDGF-BB最佳造模条件和HES最佳干预浓度;VSMCs分为对照组(0μg/L PDGF-BB)、造模组(25μg/L PDGF-BB)及加药组(25μg/L PDGF-BB+100μmol/L橙皮素),采用划痕实验检测各组VSMCs的细胞迁移能力,采用Western blot检测各组VSMCs的α-SMA、平滑肌22α(SM22α)、弹性蛋白原(ELN)及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达.结果:原代平滑肌细胞呈长梭形,传代2 d后VSMCs有典型的"峰-谷"状特征,α-SMA鉴定阳性率>95％;PDGF-BB最佳造模浓度是25μg/L,HES最佳干预浓度是100μmol/L;与对照组比较,造模组VSMCs迁移率增加,α-SMA及SM22α蛋白表达下降,但ELN和PCNA蛋白表达上升(P<0.001);与造模组比较,加药组VSMCs迁移率降低,α-SMA及SM22α蛋白表达上升,但ELN、PCNA蛋白表达下降(P<0.001).结论:PDGF-BB可诱导大鼠胸主动脉VSMCs的增殖及增强其迁移能力,HES可通过抑制PDGF-BB的作用从而影响VSMCs的表型转化.

关键词：细胞增殖、血管平滑肌细胞、原代培养、血小板源性生长因子-BB、橙皮素、表型转化

所属期刊栏目：45

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金81860089

在线出版日期：2020-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：745-751,759