大鼠Slfn3基因重组腺病毒载体的构建和包装

摘要：

目的:构建携带大鼠Slfn3基因的重组腺病毒表达载体,转染HEK293细胞产生病毒.方法:以pMSV-Slfn3-GFP为模板扩增Slfn3基因,再以质粒pAdeno-EF1a-MCS-MCMV-EGFP-3FLAG为载体,通过酶切、连接及转化获得pAdeno-EF1a-Slfn3-MCMV-EGFP-3FLAG重组腺病毒载体,采用内切酶NheI酶切及测序鉴定重组腺病毒载体,将该重组载体在HEK293细胞进行包装和放大培养,镜下观察荧光、Western blot鉴定重组质粒标签Flag蛋白在HEK293细胞中的表达.结果:构建重组腺病毒质粒pAdeno-EF1a-Slfn3-MCMV-EGFP-3FLAG,并在HEK293细胞中成功包装和扩增,经鉴定获得重组腺病毒rAD-Slfn3.结论:成功构建重组腺病毒载体pAdeno-EF1-Slfn3-MCMV-EGFP-3FLAG,并在HEK293细胞成功获得重组腺病毒rAD-Slfn3.

关键词：大鼠、心血管疾病、Slfn3基因、重组腺病毒、构建、包装

所属期刊栏目：45

分类号：R541.1(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省科技厅基金[黔科合基础20161120],[黔科合平台人才20185608], [黔科合平台人才20185779-36],[黔科合平台人才20185779-38],[黔科合平台人才20185779-52; 贵阳市科技局基金[筑科合同20175-14], [筑科合同201730-10];贵州省卫生计生委基金[gzwjkj;贵州省教育厅青年科技人才成长项目[黔教合KY字2018182;贵州省人社厅留学人员科技创新项目[黔人项目资助合同20180003

在线出版日期：2020-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：260-264,269