家蝇三龄幼虫Mdctl基因原核表达及生物信息学分析

摘要：

目的:构建家蝇C型凝集素基因(Mdctl)原核表达体系,对Mdctl基因及编码蛋白进行生物信息学分析.方法:采用生物信息学方法,分析Mdctl基因及编码蛋白;将构建的pET28a(+)/Mdctl重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21-DE3中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白并通过SDS-PAGE对表达产物进行分析;Ni-IDA法纯化重组蛋白,Western-Blot对其鉴定.结果:生物信息学分析显示,Mdctl基因开放阅读框全长333 bp,共编码110个氨基酸,理论分子量为13.13 kDa,等电点为4.49,信号肽位于1～22位氨基酸之间;Mdctl蛋白中存在Clect结构域,属于C型凝集素超家族;Mdctl重组蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中主要以包涵体形式表达,重组蛋白的相对分子质量与Mdctl蛋白两端融合6×His标签后的总分子量相一致.结论:成功构建Mdctl原核表达系统,并获得重组蛋白.

关键词：家蝇、Mdctl基因、原核表达、蛋白纯化、生物信息学、基因表达

所属期刊栏目：45

分类号：R384.2(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金项目;国家科技支撑计划;贵州省农业攻关[黔科合NY20143054;贵州省科学技术基金[黔科合J字20122038

在线出版日期：2020-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：145-150