甲基结合蛋白1对小鼠胚胎干细胞增殖及克隆形态的影响

摘要：

目的:研究甲基结合蛋白1(Mbd1)对小鼠胚胎干细胞克隆形态及增殖的影响.方法:设计针对Mbd1转录起始位点的gRNA,将表达有gRNA和Cas9蛋白的质粒使用脂质体转染方法转入小鼠胚胎干细胞(J1);使用抗生素将未转染成功的细胞杀死后,细胞继续培养7d,挑取单克隆细胞,采用PCR法筛选敲除Mbd1的纯合子细胞,观察Mbd1缺失对小鼠胚胎干细胞克隆形态的影响;使用细胞计数法检验Mbd1对胚胎干细胞增殖的影响.结果:通过Cripsr/Cas9成功获得敲除Mbd1的胚胎干细胞,Mbd1缺失后的小鼠胚胎干细胞丧失了常规小鼠胚胎干细胞的3D克隆形态,细胞呈现单层扁平克隆;Mbd1缺失后小鼠胚胎干细胞增殖速率变慢.结论:Mbd1通过影响小鼠胚胎干细胞克隆形态和增殖而影响胚胎干细胞的多能性.

关键词：甲基结合蛋白、胚胎干细胞、多能性、细胞增殖、神经前体细胞、基因敲除

所属期刊栏目：44

分类号：R741.02(神经病学与精神病学)

资助基金：贵州医科大学博士启动基金院博合J字2018016号;国家自然科学基金项目31660316;中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助2017PT31042;贵州省教育厅导师工作室黔教研合GZS201602

在线出版日期：2019-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：621-625