流式实验试剂的使用和操作对贴壁细胞的细胞周期结果的影响

摘要：

目的:分析实验试剂的使用和操作对流式细胞术检测贴壁细胞的细胞周期结果的影响.方法:根据在染色液中是否添加RNA酶、收集贴壁细胞时是否收集培养液及操作时是否吹打的方式,将混悬细胞分为6组(每种处理方式分2组),用碘化丙啶(PI)试剂盒对MBA-MD-231细胞进行染色,采用FC-500流式细胞仪对贴壁细胞的细胞周期进行检测,观察染色液中是否添加RNA酶、是否收集培养液、或是否吹打对细胞流式信号分布图的影响.结果:染色液中添加RNA酶会造成流式信号分布图中细胞周期检测信号峰度变窄,各时期细胞比例发生变化;与仅收集贴壁细胞组相比,收集培养液时细胞碎片百分比略有增加(2.18％ vs 1.24％),但对细胞周期检测结果没有影响;混悬细胞时过度吹打(≥30次)不影响细胞周期检测结果,但会造成细胞碎片百分比略有增加(2.31％ vs1.24％).结论:采用流式细胞术分析细胞周期时须添加RNA酶,实验操作时是否收集培养液和吹打细胞对细胞周期检测结果的影响不大.

关键词：贴壁细胞、细胞周期、流式细胞术、细胞碎片

所属期刊栏目：42

分类号：R34-33(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31660316;贵州省应用基础研究计划重大专项黔科合J重大字20152003

在线出版日期：2018-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1253-1257