缺氧下HIF-1α对胰腺癌细胞“干性”的影响及机制

摘要：

目的:通过构建人胰腺癌PANC-1、AsPC细胞缺氧模型、检测缺氧对胰腺癌细胞“干性”及生物学恶性行为的影响.方法:在缺氧培养箱中构建人胰腺癌PANC-1、AsPC细胞缺氧模型,通过Western Blot检测胰腺癌细胞中缺氧诱导因子(HIF-la)表达情况;通过悬浮培养成球实验检测肿瘤细胞成球生长能力,流式细胞术检测胰腺癌细胞表面CD133阳性率,PCR和Western blot实验检测常氧和缺氧培养下干性相关基因(BMI-1、OCT4A、Nanog、SOX2)在mRNA以及蛋白水平的表达差异,免疫荧光观察CD133的表达量以及其定位变化.结果:随着缺氧时间的延长,HIF-1a、CD133表达逐渐上升,在16h时HIF-1a表达处于高峰;缺氧时间超过16h后,随着HIF-1a表达降低,CD133表达也降低,同时缺氧胰腺癌细胞悬浮成球能力增强,CD133+细胞比例增多,干性标记物mRNA表达上调,差异具有统计学意义(P＜0.05);缺氧培养下胰腺癌表面标记CD133阳性率显著上调,差异具有统计学意义(P＜0.05);在缺氧条件下,下调HIF-1α后,BMI-1、OCT4A、Nanog、SOX2表达显著下调,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:缺氧可诱导胰腺癌细胞“干性”维持或增强,在缺氧条件下HIF-lα对胰腺癌细胞“干性”调节有着重要作用.

关键词：胰腺肿瘤、缺氧、流式细胞术、缺氧诱导因子、干性、CD133

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分类号：R735.9(肿瘤学)

资助基金：国家国际科技合作专项资助项目2014DFA31420;国家自然科学基金资助项目81660483;贵州省科学技术厅-贵州医科大学附属医院联合资金黔科合LH字20167229号;贵州省第四批人才基地基金资助项目黔省专合字201294号;贵州省科学技术厅-贵阳医学院院士工作站肝胆外科分站资助项目黔科合院士站20154013;贵州医科大学肝胆胰脾重点实验室项目资助

在线出版日期：2018-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1247-1252,1257