缺氧缺糖海马神经元模型最佳造模时间的选择

摘要：

目的:建立可靠合理的海马神经元缺氧缺糖(OGD)模型.方法:用培养5d的海马神经元细胞,采用三气培养箱联合EBSS液,进行OGD造模;于培养0.5、1、2及3h时收集海马神经元细胞,倒置显微镜下观察海马细胞的形态,并采用MTT法通过检测海马细胞的吸光度(OD)值绘制海马神经元OGD损伤时效曲线,筛选海马神经元OGD最佳造模时间.结果:倒置显微镜下可见随着OGD时间的延长,神经元细胞受损越严重,生长状态越差,胞体从正常的饱满圆润,折光性、立体感强,神经元细胞轴突长,形状粗壮,数量多,与树突相互交集呈网络状;细胞贴壁牢固,变成大部分神经元胞体与自身轴突、树突连接断裂,有的胞体,细胞直接从培养板壁上脱落,脱落的细胞堆积在一起;从海马神经元OGD损伤时效曲线可发现前5d海马神经元生长迅速,第5天到达高峰期,第5～7天为平台期,第8天后活力稍下降;与OGD0h(正常)OD值比较,OGD0.5、1、2及3h的OD值减低(P＜0.05),表明所采用的OGD造模方法是成功的,OGD2h时细胞的损伤程度为正常细胞组30％,可作为正式实验OGD模型.结论:三气培养箱联合EBSS液可进行体外OGD造模,最佳的细胞模型为培养2h.

关键词：神经元、海马、缺氧缺糖、MTT、模型、细胞

所属期刊栏目：42

分类号：R338.1;R343.3(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81260601;贵州省科学技术基金项目黔科合J字20082174号;贵州省科技计划基金资助项目黔科合中药字2011LKZ7003号;贵州省教育厅自然科学研究项目黔教科2008031号;贵州省中医药管理局资助课题项目QZYY2010-48

在线出版日期：2017-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：778-782