核不均一核糖核蛋白C2基因克隆及其对肝癌细胞生长的影响

摘要：

目的:探讨人核不均一核糖核蛋白C2(RNPC2)基因在肝癌细胞生长增殖中的作用.方法:采用RTPCR方法扩增肝癌细胞SMMC-7721 RNA中RNPC2基因编码区的目的片段,构建真核表达载体pEGFP-RNPC2并进行细胞转染;采用G418抗生素筛选稳转细胞,SDS-PAGE和Western blot法测定稳转细胞内RNPC2蛋白表达,CCK-8法测定稳转细胞的增殖能力.结果:从培养的肝癌细胞SMMC-7721中抽提总RNA并反转录成cD-NA,通过RNPC特异性引物扩增出RNPC2基因;测序鉴定获得双酶切分离纯化目的片段后,插入真核表达载体pEGFP-C1中,成功构建真核表达载体pEGFP-RNPC2;通过细胞稳定转染、G418药物筛选和荧光显微术获得表达外源融合蛋白GFP-RNPC2的稳转细胞株,并用Western blot验证及CCK-8分析证明GFP-RNPC2稳转细胞的生长增殖速率增加.结论:RNPC2可以促进肝癌细胞生长增殖.

关键词：肝肿瘤、核不均一核糖核蛋白C2、细胞、细胞增殖、真核表达、脂质体、转染

所属期刊栏目：42

分类号：R361.3(病理学)

资助基金：国家自然科学基金81560390;贵州省科学技术基金黔科合J字20102,黔科合J字20142025号;贵阳医学院院基金院基金合同字第017号

在线出版日期：2017-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：626-630