同源重组与Gibson Assembly方法构建腺病毒载体

摘要：

目的：对比同源重组与Gibson Assembly两种方法构建腺病毒载体的效率。方法：增殖并提取AD4 DNA，分别用同源重组与Gibson Assembly两种方法，将AD4 DNA镶嵌入pBR322质粒，构建出携带有全长AD4 DNA的腺病毒载体，并进行PCR和测序鉴定，对比两种方法构建腺病毒载体的筛选效率。结果：两种方法均能构建出正确的腺病毒载体；筛选同源重组法1000个菌落中，鉴定360个，仅有1个菌落；Gibson Assembly法112个菌落数中，鉴定其中10个，有3个阳性。结论：Gibson Assembly方法比传统同源重组方法在构建腺病毒载体时更有效。

关键词：腺病毒、疫苗、重组载体、Gibson Assembly

所属期刊栏目：41

分类号：R346(人体生物化学、分子生物学)

在线出版日期：2016-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：430-435