Hsa-microRNA-138慢病毒表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的:构建hsa-microRNA-138慢病毒表达载体.方法:PCR扩增pri-miR-138-2前体序列,克隆至plenti-GFP慢病毒表达载体,双酶切及测序鉴定正确后进行慢病毒包装与滴度检测 ;构建成功后感染人胰腺癌细胞PANC-1,48 h后Real-time Q-PCR检测miR-138的表达.结果:酶切、测序鉴定证明插入序列正确,测定病毒滴度为1×109TU/ml,病毒感染48 h后的PANC-1胰腺癌细胞观察可见绿色荧光,Real-time Q-PCR显示被感染细胞的miR-138表达量较未感染细胞显著增高.结论:建立了高效稳定表达hsa-miR-138的慢病毒转染系统.

关键词：RNA、小干扰、慢病毒属、载体、波形蛋白、胰腺肿瘤

所属期刊栏目：37

分类号：R373-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助81160311;贵州省科技厅贵阳医学院社发联合基金资助[黔科合20103171],贵阳市科技局社会发展与民生科技计划资助筑科合2011103 22号

在线出版日期：2013-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：469-472,475