登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列pcDNA3.1载体的构建

摘要：

目的: 克隆登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列,构建NS1基因部分序列的真核表达载体.方法: 用PCR技术扩增登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列,并定向克隆入pcDNA3.1(+)的kpnⅠ、xhoⅠ位点,构建真核重组载体pcDNA3.1(+)-NS1,转化Ecoli DH5a.阳性重组质粒用PCR、酶切及序列测定等方法鉴定.电穿孔法将真核重组载体转染COS-7细胞,RT-PCR鉴定其表达情况.结果: 阳性质粒经kpnⅠ及xhoⅠ双酶切及PCR获得了1个核苷酸长度为 413 bp的基因,序列测定证实与NGC株NS1基因部分基因序列有99%同源,重组真核质粒转染COS-7细胞经RT-PCR鉴定证实有表达.结论: 成功构建了含有登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列基因的真核重组载体pcDNA3.1(+)-NS1.

关键词：登革热病毒、克隆细胞、序列分析、基因表达、质粒

所属期刊栏目：34

分类号：R373.33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家973计划前期研究专项项目2008CB517408;国家自然科学基金资助项目30560148

在线出版日期：2009-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：357-359,365