人BclGL基因siRNA逆转录病毒的制备及其对T淋巴细胞增殖的影响

摘要：

目的:制备表达针对BclGL基因的siRNA逆转录病毒,研究其对体外培养Jurkat细胞中BclGL基因的沉默效应及Jurkat细胞增殖的影响.方法: 利用siRNA预测软件获取3条siRNA 编码序列,插入pSilencer 5.1-H1构建重组逆转录病毒siRNA表达质粒,脂质体法转染PT67细胞包装重组逆转录病毒pSilencer 5.1-H1-BclGL,体外感染Jurkat细胞,嘌呤霉素筛选病毒感染阳性细胞克隆,实时定量 PCR 及 Western 验证干扰效率;CCK-8法体外检测BclGL基因沉默后Jurkat细胞的增殖能力.结果: 酶切及测序结果证实,表达siRNA的逆转录病毒构建成功,重组病毒表达的siRNA能有效干扰Jurkat细胞内BclGL基因的表达;BclGL表达下调可增强Jurkat细胞的增殖能力ela.结论: 成功制备了表达人BclGL基因 siRNA的重组逆转录病毒,并证实其对Jurkat细胞的生长抑制效应.

关键词：BclGL基因、病毒、siRNA、T淋巴细胞、逆转录聚合酶链反应

所属期刊栏目：34

分类号：Q754;R446.63(分子遗传学)

资助基金：国家自然基金面上项目30671886

在线出版日期：2009-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：250-254