10.3969/j.issn.1000-2707.2009.01.002
人BNIP3基因在Hela细胞中的表达及定位
目的:构建BNIP3-HA融合蛋白的真核表达载体,观察BNIP3在Hela细胞中表达及其定位.方法:采用两步克隆法将HA和BNIP3的编码序列以融合表达的形式克隆到载体pcDNA3上,随后转染Hela细胞.BNIP3经AlexaFluor 488免疫荧光标记,线粒体用MitoFluor Red 589染色后在荧光显微镜下观察BNIP3的表达和定位.结果:重组质粒经酶切、聚合酶链反应(PCR) 和测序鉴定构建正确,并在Hela细胞中能够表达,在荧光显微镜下观察,BNIP3-HA融合蛋白分布于线粒体.结论:成功构建BNIP3-HA融合蛋白表达载体并在Hela细胞线粒体中表达.
基因、bcl-2、Hela细胞、线粒体、荧光免疫测定、细胞内定位
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R73-75;Q753(肿瘤学)
长江学者和创新团队发展计划IRT0731;国家自然科学基金委员会-广东省人民政府自然科学联合基金重点项目U0632004;国家自然科学基金项目30670829
2009-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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