RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞α7神经型尼古丁受体基因的表达

摘要：

目的:利用小分子干扰RNA(RNAi)技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中α7 神经型尼古丁受体(nAChR)基因的表达,并研究α7 nAChR基因表达受抑制后对细胞存活率及脂质过氧化水平的影响.方法:设计并通过分子生物学方法合成α7 nAChR基因特异性小分子干扰RNA(siRNA),转染SH-SY5Y细胞,培养48 h后收集细胞,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和西印迹方法(Western-blotting)检测转染细胞中α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化,并用1 μmol/L β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)处理siRNA转染细胞,比色法测定脂质过氧化产物含量.四氮基偶氮唑蓝(MTT)方法测定细胞活力.结果:转染siRNA后,与对照组相比,实验组α7 nAChR mRNA及蛋白表达量降低,抑制率分别为52%和36%,脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加,MTT法表明实验组细胞活力明显低于对照组,且能增强Aβ的细胞毒性作用.结论:特异性siRNA能有效抑制α7 nAChR基因的表达,α7 nAChR基因的表达的抑制能增加Aβ的神经毒性作用,间接说明α7 nAChR有一定的神经保护作用,其表达减少与阿尔茨海默病的发生有一定关系.

关键词：阿尔茨海默病、转染、神经母细胞瘤、逆转录聚合酶链反应、RNA干扰、α7神经型尼古丁受体

所属期刊栏目：31

分类号：R749.1(神经病学与精神病学)

资助基金：中国科学院资助项目30460045

在线出版日期：2006-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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