工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-lac2)的构建及诱导表达漆酶的研究

摘要：

用PCR法扩增枯草芽孢杆菌的漆酶基因lac2.构建表达质粒pPIC9K-lac2.通过电转法将lac2基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性和高表达漆酶的转化子作为工程菌GS115(pPIC9K-lac2).在发酵罐中发酵GS115(pPIC9K-lac2)表达重组蛋白.在50 L发酵罐中加入20 L无机盐发酵培养基.在发酵的第一阶段连续24 h补加50％甘油-0.8％ PTM4增殖P.pastoris,然后用甲醇-0.8％ PTM4诱导49 h.在发酵过程中,通过调节搅拌的频率和通气量,将溶氧维持于20％ ～30％,用氨水维持pH 5.0.放罐时生物量为A600=266.5,表达漆酶1097.5U/L发酵液.

关键词：漆酶、枯草芽孢杆菌、基因表达、P.pastoris、发酵、高密度发酵

所属期刊栏目：43

分类号：Q78;S852.7;Q939.9

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项ITBB120503

在线出版日期：2013-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：36-40