10.3969/j.issn.1001-6678.2009.03.011
用E.coli表达Canstatin-N及其表达条件优化
以重组质粒pET-CN为模板设计引物CASN1N和CASN2,PCR方法扩增约267 bp的人血管能抑素N端1~89 氨基酸基因片段,用EcoR I和Sal I双酶切将其克隆进pET-22b(+)载体获得重组表达质粒pET-22b(+)-CN,转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导表达Canstatin-N,产物以包涵体形式存在.本文在摇瓶发酵条件下研究了诱导剂浓度、诱导培养时间对目标蛋白表达的影响,结果表明IPTG的最佳诱导浓度为0.1mmol/L;37℃下诱导培养2h时产物表达量最高.纯化获得的融合his6的重组Canstatin-N具有免疫和抑制鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成活性.
Canstatin-N、大肠杆菌、基因表达、血管生成
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Q786;S855.3;R737.9
国家自然科学基金30760061
2009-07-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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