EGF-SEA融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化

摘要：

根据基因库中查到的金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因序列和人体表皮生长因子(EGF)基因序列进行密码子优化,以适于大肠杆菌表达.人工合成SEA基因与EGF基因.将两目的基因克隆至原核表达栽体pFT22b中,经测序验证表明成功构建了重组表达质粒pET22b-EGF-SEA.将构建好的pET22b-EGF-SEA质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导进行表达;SDS-PAGE分析表明融合基因EGF-SEA在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式得到了高效表达,产物相对分子质量约为44kDa,与理论值大小一致.包涵体经洗涤,变性、复性后用His Bind Kit进行分离纯化,所得蛋白纯度≥95%.高纯度EGF-SEA融合蛋白的获得为进一步研究其生物学活性及肿瘤治疗奠定了基础.

关键词：EGF基因、SEA基因、融合蛋白、构建、表达、纯化

所属期刊栏目：38

分类号：R378.21;Q51;S852.65

资助基金：天津市科委资助的应用基础研究重点项目06YFJZJC02600

在线出版日期：2008-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：31-34