一种快速筛选海藻糖合成酶突变体体系的建立

摘要：

利用λRed重组系统对大肠杆茵JM109的6-磷酸海藻糖合成酶基因OtsA和6-磷酸海藻糖酯酶基因otsB进行敲除,获得otsA和otsB基因失活的大肠杆菌突变体,该突变体由于对渗透压变得非常敏感,在舍5%NaCl和0.5%麦芽糖的培养基中生长缓慢,然而当导入有活力的外源海藻糖合成酶基因后,由于能在胞内合成海藻糖,增强了细胞抗高渗透压培养基的能力,因而可让otsA和otsB基因缺失后的JM109得以恢复其生长能力.通过比较它们在高渗透压的培养基中的生长速度,可以筛选出含有不同活力的海藻糖合成酶突变体.

关键词：λRed重组系统、海藻糖合成酶基因、基因缺失

所属期刊栏目：38

分类号：Q943.2;S572;S685.16

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）2004CB719606

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：22-26