构建基因工程菌发酵产生维生素C的前体2-酮基-L-古龙酸

摘要：

从棒状杆菌SCB3058克隆得到两个2,5-DKG**还原酶基因后,构建了两个能够表达2,5-DKG还原酶的基因工程大肠杆菌BL21(DE3)PET9aⅡ和DH5α(pBL4)和一个基因工程欧文氏菌ER97.2,5-DKG还原酶基因分别受控于PL或T7启动子,通过加入IPTG或提高温度进行诱导,SDS-PAGE和酶活测定确定它们在诱导后得到了高表达,用细胞抽提液在加入辅酶NADPH的体外实验中转化2,5-DKG,HPLC检测证明能够产生大量2-KLG,然后在摇瓶水平上研究了它们转化2,5-DKG产生2-KLG的能力,结果表明采用合适的培养基,经过适时的诱导,它们都能够转化2,5-DKG产生2-KLG,它们的产量可能与细胞内NADPH水平、2-KLG跨膜转运以及还原2-KLG的酶水平有非常直接的关系.进一步提高产量需要对培养基和发酵条件进行优化.

关键词：2、5-DKG还原酶、发酵、2-KLG

所属期刊栏目：30

分类号：O6(化学)

资助基金：国家自然科学基金39770021

在线出版日期：2007-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：9-14