10.11675/j.issn.0253-4304.2022.08.16
微小RNA-22对髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响及其机制
目的 分析微小RNA-22(miR-22)对髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响,并探讨其可能作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测正常人神经细胞RGC-5细胞和髓母细胞瘤细胞系UW402、UW473、DAOY和ONS-76细胞中miR-22的表达水平.将DAOY细胞分为对照组、miR-22 NC组、miR-22 mimics组、miR-22 mimics+740Y-P组,分别转染LipofectamineTM 2000试剂、miR-22 NC、miR-22 mimics、miR-22 mimics,同时,转染24 h后,miR-22 mimics+740Y-P组加入10μmol/L的740Y-P 200μL.采用CCK-8法和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt蛋白相对表达水平.将20只裸鼠随机分为对照组、miR-22 NC组、miR-22 mimics组、miR-22 mimics+740 Y-P组,各5只,分别移植相应组别的细胞后,观察皮下移植瘤体积.结果 与正常人神经细胞RGC-5细胞相比,miR-22在髓母细胞瘤细胞系中均呈低表达状态,且在DAOY细胞中的表达水平最低(均P<0.05).与对照组和miR-22 NC组比较,miR-22 mimics组DAOY细胞的增殖和侵袭能力下降,凋亡率增高,PI3K和Akt磷酸化水平降低,且裸鼠的皮下移植瘤体积减小(均P<0.05);与miR-22 mimics组相比,miR-22 mimics+740Y-P组细胞的增殖和侵袭能力增强,凋亡率降低,PI3K和Akt磷酸化水平升高,且裸鼠的皮下移植瘤体积增大(均P<0.05).结论 上调miR-22表达可抑制髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为,其机制可能与调控PI3 K/Akt信号通路有关.
髓母细胞瘤、微小RNA-22、细胞增殖、细胞侵袭、细胞凋亡、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路、细胞实验、裸鼠
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R739.41(肿瘤学)
湖南省卫生健康委科研计划项目;湖南省株洲市科技计划
2022-06-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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