人心肌细胞中 NLRP3融合蛋白表达的鉴定

摘要：

目的：构建人NLRP3真核表达载体并证实NLRP3融合蛋白在人心肌细胞中表达。方法以人胎脑cDNA文库为模版，PCR扩增NLRP3全长编码基因，亚克隆至pCDNA3．1-myc-his A表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人心肌细胞中，提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用流式细胞仪观察Myc-NLRP3在人心肌细胞内的作用。结果 NLRP3全长基因序列克隆到了真核表达载体 pCDNA3．1-myc-his A中，酶切鉴定片段大小为3111 bp。 Western blot检测到了融合蛋白Myc-NLRP3表达，分子量约为114 KD。 Myc-NLRP3在人心肌细胞中过表达，能够促进细胞凋亡。结论成功构建了Myc-NLRP3全长基因真核表达载体，过表达Myc-NLRP3能够促进心肌细胞凋亡。

关键词：心肌细胞、质粒构建、NLRP3、蛋白印迹、流式细胞仪

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

在线出版日期：2014-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：8-9,38