IGF-Ⅱ基因RNAi慢病毒载体构建与稳定转染细胞株建立

摘要：

目的 构建人的IGF-Ⅱ基因RNA干扰慢病毒载体并建立人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13稳定转染细胞株.方法 根据人的IGF-Ⅱ基因序列,设计3条针对IGF-Ⅱ-shRNA序列,分别构建pLLU2G-shIGF-Ⅱ 3个慢病毒载体.筛选出最有效沉默靶基因的shRNA后,将携带目的 序列的慢病毒载体转染到293FT细胞中,感染人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13,建立稳定转染细胞株.结果 设计的针对IGF-Ⅱ的序列中第3条的抑制效果最好,下调80%.以此目的 序列构建稳定转染细胞株,对IGF-ⅡmRNA抑制率达95%.结论 成功构建表达人肾上腺皮质瘤IGF-Ⅱ-shRNA的慢病毒载体,它能有效沉默IGF-Ⅱ基因在人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13中的表达并建立稳定转染细胞株.

关键词：IGF-Ⅱ、RNAi、SW-13、shRNA、慢病毒载体、转染细胞

所属期刊栏目：34

分类号：R586(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：中华医学会内分泌学分会边远地区基金项目CSE2009009

在线出版日期：2012-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：677-680