短发夹RNA沉默HIPK2对口腔鳞癌SCC-25细胞株增殖、自噬和裸鼠移植瘤生长的影响

摘要：

目的:探究HIPK2短发夹RNA对口腔鳞癌SCC-25细胞株增殖、自噬和裸鼠移植瘤生长的影响.方法:将SCC-25分为未转染的Control组、转染shRNA-NC阴性对照载体的shRNA-NC组,转染HIPK2-shRNA1慢病毒载体的HIPK2-shRNA1组,转染HIPK2-shRNA2慢病毒载体的HIPK2-shRNA2组.RT-qPCR检测HIPK2 mRNA水平;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡;western blotting检测HIPK2、c-Myc、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Bcelin1、ATG7、LC3 Ⅰ和LC3 Ⅱ蛋白表达水平.将转染HIPK2-shRNA2的SCC-25细胞皮下注射裸鼠建立裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分为2组,Control组和HIPK2-shRNA2组,检测裸鼠肿瘤重量,TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡,免疫组化染色检测肿瘤Caspase-3阳性细胞数,west-ern blotting检测LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值.结果:体外实验中,与Control组比较,HIPK2-shRNA1组、HIPK2-shRNA2组HIPK2 mRNA水平和蛋白表达水平降低,克隆形成率降低,细胞凋亡率升高,c-Myc蛋白表达水平降低,cleaved Caspase-3/Caspase-3、Bax/Bcl-2比值升高,Bcelin1、ATG7蛋白表达水平和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值升高(均P＜0.05).体内实验中,与Control组比较,HIPK2-shRNA2组裸鼠肿瘤重量降低,Caspase-3阳性细胞数升高,肿瘤细胞凋亡率升高,LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值升高(均P＜0.05).结论:HIPK2短发夹RNA抑制SCC-25细胞增殖,诱导细胞凋亡和自噬,并抑制裸鼠移植瘤的生长.

关键词：口腔鳞状细胞癌;HIPK2;凋亡;自噬

所属期刊栏目：38

分类号：R739.8(肿瘤学)

资助基金：2020年恩施州科技计划指导性项目No.F20200016

在线出版日期：2021-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2104-2109