RT-PCR法测定脂肪组织解偶联蛋白mRNA表达水平的探讨

摘要：

目的:建立解偶联蛋白(UCP) mRNA表达水平的竞争性RT-PCR测定法;并应用该方法测定UCP mRNA在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织的表达水平.方法:应用剪接重叠延伸PCR (SOE-PCR)合成中央缺失型UCP竞争者RNA.UCP mRNA 与作为内设标准的UCP竞争者RNA用相同的引物在同一反应体系中进行逆转录反应和PCR扩增.通过比较UCP mRNA产物和UCP竞争者RNA产物的放射性信号强度求取UCP mRNA表达水平.结果:腹膜内与腹膜外脂肪组织样品中均检测到UCP mRNA;UCP mRNA表达水平腹膜内脂肪组织为(6.853±4.207)amol/fmol β-actin,腹膜外脂肪组织为(0.521±0.497)amol/fmol β-actin(()±s)(P<0.001).结论:本竞争性RT-PCR方法测定脂肪组织UCP mRNA表达水平灵敏、准确;UCP mRNA在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织均有表达,并且表达水平腹膜内脂肪组织高于腹膜外脂肪组织.

关键词：解偶联蛋白、mRNA、RT-PCR

所属期刊栏目：16

分类号：Q753(分子遗传学)

资助基金：桂林医学院校科研和教改项目;奥地利萨尔茨堡医学研究项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：242-244