激活NF-κB信号通路的土壤微生物代谢产物提取物的筛选
目的 筛选能够明显影响核离子(NF)-κB信号通路的土壤微生物代谢产物.方法 微生物接种液体培养基中,于180 r/min、30℃摇床培养,3d后,加入终浓度70%的乙醇裂解过夜.裂解物离心,取上清,旋转蒸发浓缩并冷冻干燥,获得微生物代谢产物提取物,采用双荧光素酶报告基因分析方法进行筛选,将pNF-κB-luc、pRL-TK质粒共转染HEK293细胞,转染后6h加入微生物代谢产物或TNF-α(阳性对照),继续培养24h后,检测荧光素酶活性.结果 在第一轮筛选中,发现30种代谢物能够激活NF-κB信号通路;28种代谢物能够抑制NF-κB信号通路.在第二轮筛选中,有13种代谢物能够明显激活NF-κB信号通路,没有明显抑制NF-κB信号通路的代谢物.在第三轮筛选和最后验证中,发现6种代谢物均能激活NF-κB (信)号通路.结论 从525种土壤微生物代谢物中筛选得到6种具有明显激活NF-κB信号通路作用的微生物代谢产物提取物.
核因子-κB、荧光素酶报告基因、微生物代谢产物
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Q93(微生物学)
2013-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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