10.3969/j.issn.1674-0440.2012.01.014
新型荧光试剂柱前衍生高效液相色谱定量分析小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质
目的 采用新合成的荧光试剂柱前衍生氨基酸类神经递质,建立其测定方法,并测定小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的含量.方法 以1,3,5,7-四甲基-8-苯基-(4’-O-(Ⅳ-琥珀酰亚胺乙酸酯))-二氟化硼-二吡咯甲烷(TMPABOSu)作为柱前荧光衍生试剂,在pH 8.8的硼酸-硼砂缓冲溶液中,30℃衍生反应5 min后获得稳定的荧光衍生产物,在反相色谱柱上,采用梯度洗脱进行5种氨基酸类神经递质标准品衍生物的分离检测,荧光激发波长为497 nm,检测波长为509 nm.结果 5种氨基酸类神经递质的线性范围为0.01~1.2 μmol/L,线性回归系数均大于0.998 1,检出限为l nmol/L(S/N=3:1).小鼠脑脊液中天门冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸和丙氨酸的含量分别为0.06、0.20、0.26、0.03和0.07 μmol/L,标准加入回收率为96%~104%,RSD为0.7%~2.9%.结论 该方法的灵敏度高、重现性好,为小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的分析检测提供了一种新方法.
高效液相色谱、柱前衍生、荧光试剂、氨基酸类神经递质、分析检测
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R917(药物基础科学)
国家自然科学基金项目30770550;国家民委科研项目09ZY011;中央民族大学青年教师科研基金项目MZ2008033
2012-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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