BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

摘要：

目的建立体外分子水平β-分泌酶(BACE1)抑制剂高通量筛选体系.方法采用均相时间分辨荧光法(HTRF),通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系.根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂.结果采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6 h、BACE1浓度为670 U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z'因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6 mol/L的化合物.结论采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选.

关键词：β分泌酶、BACE1抑制剂、均相时间分辨荧光、高通量筛选、Z’因子

所属期刊栏目：37

分类号：R9651;R9652(药理学)

资助基金：国家科技重大专项--综合性新药研究开发技术大平台资助项目2009zx09502-017;国家自然科学基金资助项目90709012、30772562、30973541;国家重点基础研究发展计划973计划资助项目2004CB518907;国家高技术研究与发展计划863计划资助项目2008AA02Z423

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：302-309