靶向活化转录因子6的短发夹RNA重组腺病毒载体构建及对猪瓣膜间质细胞增殖与凋亡的影响

摘要：

目的:构建猪活化转录因子6-短发夹RNA(ATF6-shRNA)重组腺病毒干扰载体,观察其对猪瓣膜间质细胞(VIC)增殖与凋亡的影响. 方法:针对猪ATF6序列设计3个shRNA干扰靶点,构建质粒,包装后进行病毒扩增,使用腺病毒转染VIC,通过定量PCR检测腺病毒对VIC中ATF6的干扰效率,通过Western blot法测定下调ATF6后VIC中胱天蛋白酶(caspase)-3的表达情况,并通过CCK-8法检测VIC增殖情况. 结果:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体.腺病毒转染VIC后,腺病毒对VIC中ATF6干扰效率提高;而ATF6、caspase-3表达显著降低;自第2天起VIC存活率升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05). 结论:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体,通过降低VIC中ATF6的表达水平,减少VIC凋亡并促进细胞存活.

关键词：短发夹RNA、活化转录因子6、重组腺病毒载体、瓣膜间质细胞、凋亡

所属期刊栏目：46

资助基金：国家自然科学基金81770383,81570351

在线出版日期：2019-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：142-145