体外缺血缺氧条件下人主动脉平滑肌细胞中1-磷酸鞘胺醇的表达变化

摘要：

目的:探讨缺血缺氧条件下1-磷酸鞘胺醇(S1P)在人主动脉血管平滑肌细胞(T/G HA-VSMC)收缩中的作用机制.方法:将传代培养的T/G HA-VSMC分为正常对照组和缺血缺氧组.缺血缺氧组采用低氧条件培养T/G HA-VSMC细胞来模拟蛛网膜下腔出血(SAH)所致的缺血缺氧环境;采用QT-PCR检测人鞘胺醇激酶1(SphK1)基因的mRNA表达;Western-blot法检测人SphK1基因的蛋白表达;ELISA法测定T/G HA-VSMC细胞上清液和细胞内S1P浓度;慢病毒载体shRNA介导的T/G HA-VSMC细胞内SphK1基因表达沉默;采用钙离子荧光探针Fluo-3/AM检测T/G HA-VSMC细胞内Ca2+浓度.结果:与正常对照组相比,缺血缺氧条件下人T/G HA-VSMC细胞内SphK1基因表达上调,且缺血缺氧组细胞培养液和细胞裂解液中S1P浓度均显著升高.缺血缺氧可诱导T/G HA-VSMC细胞内Ca2+离子浓度增加,并且外源性S1P显著上调T/G HA-VSMC细胞内Ca2+浓度;与正常对照组相比,shRNA干扰技术沉默SphK1基因表达和SphK1特异性抑制剂二甲基鞘胺醇(DMS)均显著抑制低氧诱导的T/G HA-VSMC细胞内S1P和Ca2+浓度上调.结论:缺血缺氧可导致T/G HA-VSMC细胞内SphK1基因表达上调,进而促进S1P的合成代谢,而高浓度的S1P通过某种机制导致细胞内Ca2+浓度水平增加导致血管收缩.

关键词：1-磷酸鞘胺醇、缺氧、人主动脉平滑肌细胞

所属期刊栏目：15

分类号：R741;R741.02(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2020-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：129-133