10.3760/cma.j.cn121382-20220707-00501
NF-κB通过Slc1a2调控树突状细胞成熟及功能的研究
目的:研究核因子-κB(NF-κB)通过溶质载体家族1成员2(Slc1a2)对树突状细胞(DC)成熟及功能的调控作用。方法:采用Slc1a2特异性的siRNA以及过表达Slc1a2真核表达载体转染小鼠骨髓来源的DC,实时荧光定量RT-PCR和Western Blot检测敲降及过表达效率,采用流式细胞术检测DC表面分子CD40、CD80及主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞因子白细胞介素(IL)-12、IL-6和转化生长因子-β(TGF-β)的分泌考察敲降Slc1a2对DC成熟和功能的影响,并考察过表达Slc1a2对DC成熟和功能的影响以及采用混合淋巴细胞培养检测Slc1a2对T细胞增殖能力的影响及ELISA检测IL-17A的分泌水平,通过流式细胞术分析DC的FITC相对荧光强度变化考察过表达Slc1a2对抗原吞噬的能力,最后采用NF-κB抑制剂甲苯酰苯丙氨酸氯甲基酮(TPCK)预处理DC,考察TPCK对DC内Slc1a2的表达及DC成熟的影响。结果:脂多糖刺激成熟的DC中Slc1a2高表达(
P<0.001)。在DC中敲降Slc1a2降低了DC成熟及刺激CD4
+ T细胞增殖的能力(
P<0.001),抑制了IL-17的分泌(
P<0.01)。过表达Slc1a2增强了DC成熟及刺激CD4
+ T细胞增殖的能力,促进IL-17A的分泌(均
P<0.01)。NF-κB抑制剂TPCK预处理DC抑制了脂多糖诱导的Slc1a2在mRNA和蛋白水平的表达。
结论:NF-κB调控了DC内Slc1a2的表达,其表达水平影响了DC的成熟及功能。
核因子-κB、溶质载体家族1成员2、树突状细胞
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国家自然科学基金32000625;National Natural Science Foundation of China32000625
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
375-383