期刊专题

10.3760/cma.j.issn.1673-4181.2019.04.003

Thbs4基因编辑BMSCs移植对糖尿病后肢缺血大鼠VEGF和Ang-1的影响及相关作用机制

引用
目的 探讨血小板反应素4(Thbs4)基因编辑骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对糖尿病后肢缺血大鼠血管内皮生长因子(VEGF)和促血管生成素-1(Ang-1)的影响及相关作用机制.方法 将30只Sprague-Dawley大鼠随机分为模型组、模型+BMSCs治疗组及模型+Thbs4-BMSCs治疗组,每组10只.各组大鼠在构建Ⅱ型糖尿病后肢缺血模型后,分别于缺血损伤区局部注射100μl的生理盐水、BMSCs悬液和Thbs4-BMSCs悬液(细胞数为2×106个).干细胞移植后第14天处死大鼠,取缺血区域附近的肌肉组织,分别采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测VEGF及磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白的表达,免疫荧光染色检测Ang-1蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测VEGF和Ang-1基因的mRNA表达,免疫组化染色检测血管性血友病因子(vWF)蛋白的表达.结果 模型+Thbs4-BMSCs治疗组的VEGF、Ang-1及vWF蛋白表达均明显高于模型组和模型+BMSCs治疗组(VEGF蛋白:P<0.01,P<0.05);VEGF和Ang-1基因的mRNA表达较模型组和模型+BMSCs治疗组均明显上调,差异均具有统计学意义(VEGF mRNA:均P<0.01;Ang-1 mRNA:P<0.01,P<0.05);p-Smad2/3蛋白表达也明显高于模型组和模型+BMSCs治疗组(均P<0.01),且加入p-Smad2/3通路抑制剂后p-Smad2/3蛋白表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Thbs4-BMSCs移植治疗糖尿病后肢缺血大鼠可有效促进缺血损伤区域促血管生成因子VEGF和Ang-1的表达,其促血管生成作用可能与激活Smad2/3信号通路有关.

糖尿病、后肢缺血、间质干细胞移植、血小板反应素4、血管生成

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深圳市科技创新委员会基础研究自由探索JCYJ20170307171034705;深圳市细胞质量检测评价公共服务平台GGFW2016030117123665;中国博士后科学基金资助项目2018M641696 Basic Research of Shenzhen Science and Technology Innovation Committee Free ExplorationJCYJ20170307171034705;Shenzhen Cell Quality Testing and Evaluation Public Service PlatformGGFW2016030117123665;Project funded by China Postdoctoral Science Foundation2018M641696

2019-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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294-300,316

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国际生物医学工程杂志

1673-4181

12-1382/R

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2019,42(4)

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