损伤脑组织提取液对体外神经干细胞存活和分化的影响

摘要：

目的 模拟颅脑创伤(TBI)后的化学微环境,探讨该微环境对神经干细胞(NSCs)存活和分化的影响.方法 获取TBI大鼠损伤区脑组织的匀浆液,用于模拟TBI后的化学微环境.分离、提取并培养大鼠原代NSCs,采用免疫荧光染色鉴定其表型.将实验分为对照组、正常脑组织提取液组(BTE组)和创伤脑组织提取液组(TBITE组).动态观察各组细胞的生长情况和形态变化,24 h后行Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3及Cleaved caspase-3的表达水平;3d后采用噻唑蓝实验和Western Blot检测NSCs的增殖情况;7d后行免疫荧光染色检测NSCs向神经元分化的水平.结果 Western Blot结果显示,与对照组相比,BTE组无明显细胞凋亡变化,而TBITE组NSCs凋亡显著增多,Bax(F=18.06,P＜0.01)和Cleaved caspase-3(F=23.86,P＜0.01)表达升高,Bcl-2表达降低(F=22.95,P＜0.01),差异均具有统计学意义.噻唑蓝实验结果显示,与BTE组相比,TBITE组NSCs增殖水平降低(F=41.99,P＜0.01),差异具有统计学意义.免疫荧光染色结果显示,与对照组相比,BTE组神经元分化率升高;而与BTE组相比,TBITE组神经元分化率降低(F=66.93,P＜0.01),差异均具有统计学意义.结论 TBI后的损伤微环境可显著抑制NSCs的存活和分化能力,从而为明确TBI后内源性神经的再生机制提供了理论基础.

关键词：颅脑创伤、化学微环境、神经干细胞、脑组织提取液

所属期刊栏目：40

分类号：R24;R36

在线出版日期：2018-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：339-345