RNase Ⅲ制备的小分子干扰RNA(esiRNA)文库构建及优势分析

摘要：

目的 建立KIF4A核糖核酸内切酶Ⅲ酶切制备的小分子干扰RNA(esiRNA)文库,并探讨这种新型siRNA制备方法的优势.方法 制备502 bp的KIF4A基因组序列作为转录模板；体外转录获得双链RNA；用核糖核酸内切酶ⅢGST融合蛋白(GST-RNaseⅢ)酶切双链RNA,制备KIF4A esiRNA文库；应用KIF4A esiRNA和化学合成的KIF4A siRNA转染胃癌细胞株SGC-7901,应用Q-RT PCR和WesternBlot分别检测KIF4A的mRNA和蛋白水平.结果 利用GST-RNaseⅢ成功制备了KIF4A esiRNA文库,该文库可有效抑制SGC-7901细胞内的KIF4A表达,且抑制效果明显优于化学合成的KIF4A siRNA.结论 用生物学方法制备的KIF4A esiRNA文库可有效抑制KIF4A在细胞内的表达,且抑制效果优于化学合成的siRNA.

关键词：RNA干扰、esiRNA文库、KIF4A

所属期刊栏目：36

分类号：R318;Q789(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金;新世纪优秀人才支持计划;天津师范大学中青年教授学术创新推进计划;天津师范大学校级项目;天津师范大学渤海学者基金项目

在线出版日期：2013-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-4,8