右美托咪定通过调节BDNF/NLRP3通路减轻氧糖剥夺诱导的人脑星形胶质细胞炎症和焦亡

摘要：

目的:本研究采用体外氧糖剥夺（OGD）模型探讨右美托咪定（Dex）在缺血性脑卒中（IS）对人脑星形胶质细胞（HA）中的作用，并揭示其潜在机制。方法:以HA为研究对象，按照随机数字表法分为10组（每组3孔）：对照组（Control组），OGD组，分别使用0.5、1.0、2.0 μmol/L Dex处理OGD模型组（0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组），在OGD模型细胞中添加200 nmol/L K-252a[脑源性神经营养因子（BDNF）抑制剂]组（OGD+K-252a组），在OGD模型细胞中添加1.0 μmol/L Dex组（OGD+Dex组），在OGD模型细胞中联合使用1.0 μmol/L的Dex和200 nmol/L K-252a组（OGD+Dex+K-252a组），在正常细胞中添加200 nmol/L K-252a组（K-252a组），正常细胞中联合使用200 nmol/L K-252a和5 μmol/L的BAY11-7082[NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）抑制剂]组（K-252a+BAY11-7082组）。以上细胞处理24 h后，采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测细胞中BDNF、NLRP3、活性胱天蛋白酶-1（caspase-1）和消皮素D（GSDMD）蛋白N端（GSDMD-N）的蛋白水平，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-1β和IL-18的含量，2′,7′-二氯荧光素二乙酸盐（DCFDA）法检测细胞中活性氧（ROS）的水平，流式细胞仪检测细胞焦亡情况。结果:与Control组比较：OGD组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均
P<0.05），BDNF蛋白水平降低（
P<0.05）；0.5 μmol/L Dex+OGD组IL-18含量、ROS荧光强度、细胞焦亡率均升高（均
P<0.05）；1.0 μmol/L Dex+OGD组和2.0 μmol/L Dex+OGD组ROS荧光强度、细胞焦亡率均升高（均
P<0.05）；K-252a组IL-1β、IL-18含量，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均
P<0.05）。与OGD组比较：0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率均降低（均
P<0.05）；1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组BDNF蛋白水平升高（均
P<0.05）；0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组NLRP3蛋白水平降低（均
P<0.05）；1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组活性caspase-1蛋白水平降低（均
P<0.05）；0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组GSDMD-N蛋白水平降低（均
P<0.05）；OGD+K-252a组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均
P<0.05），BDNF蛋白水平降低（
P<0.05）；OGD+Dex组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均降低（均
P<0.05），BDNF蛋白水平升高（
P<0.05）。与OGD+Dex组比较，OGD+Dex+K-252a组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均
P<0.05），BDNF蛋白水平降低（
P<0.05）。与K-252a组比较，K-252a+BAY11-7082组IL-1β、IL-18含量，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均降低（均
P<0.05）。
结论:Dex通过诱导BDNF的释放，阻断NLRP3通路的过度活化从而减轻由OGD诱导的星形胶质细胞炎症和细胞焦亡。

关键词：右美托咪定、星形胶质细胞、炎症、细胞焦亡、脑源性神经营养因子、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

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资助基金：上海市虹口区卫健委面上项目虹卫1902-11;General Project of Shanghai Hongkou District Health CommissionHongwei 1902-11

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：18-25