微RNA-27a通过PI3K/Akt信号通路调控大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制研究

摘要：

目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B (phosphoinositide-3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt）信号通路在微RNA （microRNA, miR）-27a调控大鼠心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）中的作用机制，并进一步明确miR-27a对大鼠心肌产生的影响是否与抑制氧化应激反应相关。方法:清洁级雄性SD大鼠，体重220~280 g，8~10周龄，96只大鼠按随机数字表分为6组（每组16只）：假手术组（Sham组）、心肌缺血再灌注组（IR组）、腺相关病毒（adeno-associated virus, AAV）空白对照+IR组（AVV-NC组）、过表达miR-27a+IR组（AAV-miR-27a组）、低表达miR-27a+IR组（AAV-miR-27a-antago组）、低表达miR-27a+IR+PI3K抑制剂组（LY组）。AAV-miR-27a组于造模前14 d尾静脉注射AAV-miR-27a进行过表达干预，AAV-miR-27a-antago组与LY组造模前14 d尾静脉注射AAV-miR-27a-antago进行低表达干预。结扎大鼠冠状动脉左前降支（left anterior descending, LAD) 30 min再灌注120 min制备MIRI模型。LY组于造模前30 min腹腔注射PI3K抑制剂LY294002 (1.5 mg/kg）。再灌注120 min后，取血样，采用ELISA法检测各组大鼠血清中肌钙蛋白T (cardiac troponin T, cTnT）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase MB, CK-MB）的浓度；比色法检测血清中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性；处死大鼠，摘取心脏切片进行H-E染色观察心肌组织病理学变化，伊文蓝-2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）法检测大鼠心肌梗死面积；比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、谷胱甘肽（glutathione, GSH）和丙二醛（malondialdehyde, MDA）水平；采用Western blot法测定心肌组织PI3K、Akt及磷酸化（phospho, p）-PI3K、p-Akt的蛋白水平。结果:与Sham组比较：IR组心肌梗死面积百分比增加（
P<0.05）；血清cTnT、CK-MB浓度及LDH活性增加（
P< 0.05）；心肌组织MDA水平增加，SOD、GSH水平降低，p-PI3K、p-Akt表达上调（
P<0.05）。与IR组比较：AAV-miR-27a组心肌梗死面积百分比增加（
P<0.05）；血清cTnT、CK-MB浓度及LDH活性增加（
P<0.05）；心肌组织MDA水平增加，SOD、GSH水平降低，p-PI3K、p-Akt表达下调（
P<0.05）。与IR组比较：AAV-miR-27a-antago组心肌梗死面积百分比降低（
P<0.05）；血清cTnT、CK-MB浓度及LDH活性降低（
P<0.05）；心肌组织MDA水平降低，SOD、GSH水平增加，p-PI3K、p-Akt表达上调（
P<0.05）。与AAV-miR-27a-antago组比较：LY组心肌梗死面积百分比增加（
P<0.05）；血清cTnT、CK-MB浓度及LDH活性增加（
P<0.05）；心肌组织MDA水平增加，SOD、GSH水平降低，p-PI3K、p-Akt表达下调（
P<0.05）。
结论:下调miR-27a表达可能通过激活PI3K/Akt信号通路以及抑制氧化应激反应减轻大鼠MIRI。

关键词：微RNA-27a、心肌、缺血再灌注损伤、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路、氧化应激

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资助基金：国家自然科学基金81860345;National Natural Science Foundation of China81860345

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：567-574