FOXO4通过抑制炎症反应减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤

摘要：

目的:探讨叉头框蛋白O（forkhead box protein O, FOXO）4在心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）损伤中的作用及对炎症反应的影响。方法:H9c2细胞体外培养至密度30%~50%，按随机数字表法分为6组（每组3孔）：对照组（Con组）、缺氧/复氧组（H/R组）、过表达FOXO4+H/R组（OF+H/R组）、过表达FOXO4阴性对照+H/R组（OF-NC+H/R组）、沉默FOXO4+H/R组（siFOXO4+H/R组）、沉默FOXO4阴性对照+H/R组（siRNA-NC+H/R组）。Con组细胞正常培养。H/R组细胞进行缺氧6 h复氧6 h处理。OF+H/R组、OF-NC+H/R组、siFOXO4+H/R组和siRNA-NC+H/R组细胞在质粒或RNAoligo转染5 h后正常培养48 h，再进行H/R处理。Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活性，乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）试剂盒检测培养液中LDH含量，实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）检测细胞内炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平，Western blot检测细胞内FOXO4蛋白水平。结果:与Con组比较，H/R组FOXO4蛋白水平下降（
P<0.05），细胞活性降低（
P<0.01），培养液中LDH水平升高（
P<0.01），细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平升高（
P<0.01）。与H/R组比较，OF+H/R组FOXO4蛋白水平升高（
P<0.01），细胞活性升高（
P<0.05），培养液中LDH水平下降（
P<0.01），细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平降低（
P<0.01或
P<0.05）。与H/R组比较，siFOXO4+H/R组FOXO4蛋白水平降低（
P<0.05），细胞活性降低（
P<0.05），培养液中LDH水平升高（
P<0.05），TNF-α、L-1β、IL-6 mRNA表达水平升高（
P<0.05）。
结论:FOXO4可以减轻H9c2心肌细胞的H/R损伤，其机制与抑制炎症反应有关。

关键词：叉头框蛋白O、H9c2细胞、缺氧/复氧损伤、炎症因子

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资助基金：国家自然科学基金面上项目81873925，82072130;江苏省自然科学基金BK20191171;National Natural Science Foundation of China General Program81873925, 82072130;Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceBK20191171

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：353-359