OGT介导的RIPK3糖基化在七氟醚后处理减轻离体大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

摘要：

目的:评估O-N-乙酰葡糖胺（O-N-acetyl-glucosamine, O-GlcNAc）糖基化修饰转移酶（O-GlcNAc transferase, OGT）介导的受体相互作用蛋白（receptor interacting protein kinase, RIPK) 3糖基化在七氟醚后处理减轻离体大鼠心肌缺血再灌注（ischemia reperfusion, IR）损伤中的作用。方法:取Langendorff离体灌注模型制备成功的大鼠心脏45个，采用随机数字表法分为5组（每组9个）：假手术组（SHAM组）、IR组、七氟醚后处理组（SPC组）、SPC+溶剂组[SPC+二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide, DMSO）组]和SPC+OGT抑制剂组（SPC+OSMI-1组）。建模完成后各组均平稳30 min，之后SHAM组给予K-H液持续灌注150 min，其余各组大鼠心脏均经历停止灌注30 min后恢复灌注2 h的过程；SPC组、SPC+DMSO组和SPC+OSMI-1组均于再灌注初给予含2.4%七氟醚的K-H液持续灌注15 min；此外，在术前准备的K-H液中，SPC+DMSO组给予50 μmol/L DMSO, SPC+OSMI-1组给予50 μmol/L OSMI-1。连续监测各组大鼠缺血前即刻（T
0）、再灌注30 min (T
1）、再灌注60 min (T
2）、再灌注90 min (T
3）、再灌注2 h (T
4）的左室峰压（left ventricular peak pressure, LVSP）、左室舒张末压（left ventricular end-diastolic pressure, LVEDP）、心率、左室压力升高最大速率（maximum rate of rise of left ventricular pressure, +dp/dt
max）与左室压力降低最大速率（maximum rate of drop of left ventricular pressure,-dp/dt
max）；在再灌注末，采用1%氯化三苯基四氮唑 （triphenyl tetrazolium chloride, TTC）染色检测各组大鼠心肌梗死范围；采用ELISA法检测各组大鼠冠状动脉漏出液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）浓度；Western blot法检测各组大鼠心脏O-GlcNAc、OGT、O-糖基化糖苷酶（O-GlcNAcase, OGA）、磷酸化受体相互作用蛋白1 (phosphorylated RIPK1, p-RIPK1）、磷酸化RIPK3 (phosphorylated RIPK3, p-RIPK3）和磷酸化混合系激酶结构域样蛋白（phosphorylated mixed lineage kinase domain-like protein, p-MLKL）蛋白水平。
结果:与T
0比较，IR组、SPC组、SPC+DMSO组、SPC+OSMI-1组T
1~T
4时心率、LVSP、+dp/dt
max、-dp/dt
max降低（
P<0.05），LVEDP升高（
P<0.05）；与SHAM组比较，IR组、SPC组、SPC+DMSO组、SPC+OSMI-1组T
1~T
4时心率、LVSP、+dp/dt
max、-dp/dt
max降低（
P<0.05），LVEDP升高（
P<0.05）；与IR组比较，SPC组和SPC+DMSO组T
1~T
4时心率、LVSP、+dp/dt
max、-dp/dt
max升高（
P<0.05），LVEDP降低（
P<0.05）。与SHAM组比较：IR组、SPC组、SPC+DMSO组、SPC+OSMI-1组心肌梗死范围和LDH浓度增加（
P<0.05），OGT和OGA蛋白水平升高（
P<0.05），p-RIPK1蛋白水平升高（
P<0.05）；IR组、SPC组、SPC+DMSO组O-GlcNAc蛋白水平升高（
P<0.05）；IR组、SPC+OSMI-1组p-RIPK3、p-MLKL蛋白水平升高（
P<0.05）。与IR组比较，SPC组、SPC+DMSO组心肌梗死范围和LDH浓度减少（
P<0.05），O-GlcNAc、OGT蛋白水平升高（
P<0.05），p-RIPK3、p-MLKL蛋白水平降低（
P<0.05）。与SPC组比较，SPC+OSMI-1组心肌梗死范围和LDH浓度增加（
P<0.05），O-GlcNAc、OGT蛋白水平降低（
P<0.05），p-RIPK3、p-MLKL蛋白水平升高（
P<0.05）。
结论:七氟醚后处理可降低离体大鼠心肌IR损伤，其机制与激活OGT介导的RIPK3糖基化有关。

关键词：糖基化、心肌、缺血再灌注损伤、麻醉药，吸入

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资助基金：国家自然科学基金82160371;江西省自然科学青年基金20212BAB216051;National Natural Science Foundation of China82160371;Jiangxi Provincial Youth Science Fund Project20212BAB216051

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：571-578