瑞芬太尼对缺氧/复氧诱导的PC12细胞损伤的作用

摘要：

目的:探讨瑞芬太尼对缺氧/复氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响及分子机制。方法:将PC12细胞按照随机数字表法分为缺氧/复氧组（缺氧15 h后复氧5 h），空白组（正常培养的细胞），瑞芬太尼低、中、高浓度组（2、10、50 mg/L瑞芬太尼处理缺氧/复氧诱导的PC12细胞），瑞芬太尼+LY294002组（10 mg/L的瑞芬太尼和50 μmol/L的LY294002处理缺氧/复氧诱导的PC12细胞），瑞芬太尼+PBS组（10 mg/L的瑞芬太尼和等量的磷酸盐缓冲液处理缺氧/复氧诱导的PC12细胞）（每组9孔）。Western blot法检测各组细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-3, cleaved caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（B-cell lymphoma-2 related X protein, Bax）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B, p-Akt）、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mammalian target of rapamycin, p-mTOR）和磷酸化信号转导和转录激活因子3（phosphorylation signal transduction and transcriptional activator 3, p-STAT3）蛋白水平；四甲基偶氮唑盐比色法（tetramethylazozolium salt colorimetric assay, MTT）检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡；活性氧（reactive oxygen species, ROS）试剂盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）试剂盒分别检测空白组、缺氧/复氧组和瑞芬太尼低、中、高浓度组ROS水平和SOD活性；ELISA法检测各组IL-1β和TNF-α水平。结果:与空白组比较：缺氧/复氧组PC12细胞的Cyclin D1、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR、p-STAT3、SOD及细胞存活率明显降低，cleaved caspase-3、Bax、IL-1β、TNF-α、细胞凋亡率及ROS荧光强度明显升高（
P<0.05）。与缺氧/复氧组比较：瑞芬太尼低、中、高浓度组PC12细胞的Cyclin D1、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR、p-STAT3、细胞存活率及SOD活性明显升高，cleaved caspase-3、Bax、IL-1β、TNF-α、细胞凋亡率及ROS荧光强度明显降低（
P<0.05）。与瑞芬太尼+PBS组比较：瑞芬太尼+LY294002组PC12细胞的cleaved caspase-3、Bax、IL-1β、TNF-α及细胞凋亡率明显升高，Bcl-2、p-Akt、p-mTOR、p-STAT3蛋白水平及细胞存活率明显降低（
P<0.05）。
结论:瑞芬太尼可促进PC12细胞增殖，抑制缺氧/复氧诱导的细胞凋亡、氧化应激和炎症因子的分泌，其机制可能与蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/信号转导和转录激活因子3（protein kinase B/mammalian target of rapamycin/signal transducers and activators of transcription 3, Akt/mTOR/STAT3）信号通路有关。

关键词：瑞芬太尼、缺氧/复氧、PC12细胞、增殖、凋亡、氧化应激

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资助基金：河北省保定市科技计划项目1941ZF097;Hebei Baoding Science and Technology Plan Project1941zf097

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：122-128