七氟醚预处理对缺氧/复氧损伤心肌细胞中自噬的影响

摘要：

目的 探讨七氟醚预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中自噬变化的影响及机制. 方法 大鼠H9C2心肌细胞采用随机数字表法分为5组(免疫印迹每组4瓶细胞,共20瓶;细胞存活率检测时细胞培养在96孔板中,每组8孔,共40孔):空白对照组(Con组)、H/R组(缺氧4h、复氧2h)、七氟醚预处理组(Sev+H/R组,给予2.5％七氟醚预处理30 min后行H/R)、叔丁基过氧化氢(tert-butylhydroperoxide,TBHP)组(TBHP+H/R组,培养基内加入浓度为25 mmol/L TBHP后行H/R)和七氟醚预处理+叔丁基过氧化氢组(Sev+TBHP+H/R组,2.5％七氟醚预处理后于25 mmol/L TBHP的培养基行H/R).复氧结束后取心肌细胞,四氮唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)检测细胞存活率,二氯荧光素法(dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,免疫印迹法检测Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein l light chain 3,LC3-Ⅱ)和Beclin l蛋白的表达. 结果 与Con组(100％)比较,H/R组和Sev+H/R组心肌细胞存活率”(52±14)％,(76±20)％”均降低(P＜0.05),ROS的产生量均增加;其余4组Beclinl和LC3-Ⅱ的表达均升高(P＜0.05).与H/R组比较,Sev+H/R组心肌细胞存活率增加(P＜0.05),ROS的产生量降低,LC3-Ⅱ和Beclin1的表达均降低(P＜0.05).与Sev+H/R组”(0.75±0.10),(0.65±0.08)”比较,Sev+TBHP+H/R组LC3-Ⅱ和Beclin1的表达”(1.02±0.08),(0.85±0.04)”均升高(P＜0.05). 结论 七氟醚预处理通过降低H/R期间ROS的产生量来降低大鼠心肌细胞H/R损伤中自噬的水平,对大鼠心肌细胞H/R损伤产生保护作用.

关键词：七氟醚、预处理、心肌细胞、缺氧/复氧损伤、活性氧、自噬

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在线出版日期：2015-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：785-789