10.3760/cma.j.issn.1673-4378.2014.04.002
不同浓度异丙酚对胎鼠海马神经元存活及凋亡的影响
目的 探讨不同浓度异丙酚对胎鼠离体海马神经元存活及凋亡的影响. 方法 SD大鼠妊娠17 d~18 d后取胎鼠海马神经元体外培养7d,应用免疫细胞化学法鉴定神经元并作为研究对象.①采用随机数字表法将其随机分为12组(每组设5个平行副孔,实验重复5次):对照组(C组)正常培养,异丙酚溶剂对照组(D组)用含0.1%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的培养基处理,不同浓度异丙酚组(P1~10组)分别用含异丙酚终浓度为0.01、0.1、0.5、1、5、10、50、100、150、200μmol/L的培养基换液处理,继续培养24 h后用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐”3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT”法检测细胞生存率;②采用随机数字表法将其随机分为7组(实验重复5次):对照组(C组)正常培养,异丙酚溶剂对照组(D组)用含0.1%DMSO的培养基处理,不同浓度异丙酚组(PⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)分别用含异丙酚终浓度为0.1、l、10、100、200μmol/L的培养基换液处理,继续培养24 h,免疫荧光细胞化学染色观察细胞核形态学结果,Annexin-V-FLUOS双染流式细胞术检测海马神经元凋亡率. 结果 ①与C组比较,D组海马神经元生存率差异无统计学意义(P>0.05);与D组比较,P1、2、5组生存率差异无统计学意义(P>0.05),P3组(102.2±2.7)%、P4组(102.9±2.7)%生存率升高(P<0.05),而P6~10组生存率分别为(97.0±3.5)%、(90.1±1.7)%、(79.8±0.9)%、(67.9±1.1)%、(42.3±2.2)%,呈浓度依赖性降低(P<0.05或P<0.01);②与C组比较,D组海马神经元凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);与D组比较,PⅠ组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),PⅡ组(4.7±0.7)%凋亡率明显降低(P<0.05),而PⅢ、Ⅳ、Ⅴ组凋亡率分别为(8.2±0.8)%、(18.1±1.1)%、(29.1±2.1)%,呈浓度依赖性升高(P<0.05或P<0.01). 结论 异丙酚对胎鼠离体海马神经元生存及凋亡的影响呈双向作用,1 μmol/L浓度异丙酚能够对抗海马神经元凋亡,提高细胞存活率,而10、100、200 μmol/L浓度的异丙酚则呈剂量依赖性地促进海马神经元凋亡,降低细胞生存率.
二异丙酚、海马神经元、细胞生存率、凋亡
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2014-06-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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