肾缺血后处理对热休克蛋白表达的影响及作用

摘要：

目的 评价肾缺血后处理(ischemic postconditioning,IPo)对热休克蛋白(heat shock protein,HSP)70、HSP27和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1,即HSP32)表达的影响及在减轻肾缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)中的作用.方法 健康雄性SD大鼠140只,体重250 g～280 g,采用随机数字表法随机分为4组(每组35只):假手术组(S组)仅开腹,游离双侧肾脏,分离双侧肾蒂不夹闭；缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组,夹闭双侧肾蒂缺血45 min,恢复灌注；IPo组,夹闭双侧肾蒂45 min,再灌注10 s,缺血10s,反复3次,恢复灌注；HSP抑制剂槲皮黄酮+IPo组(Q+IPo组),缺血前lh腹腔注射槲皮黄酮100 mg/kg,余操作同IPo组.于再灌注即刻(T0)、1、3、6、12、24、48 h(T1～6)时取5只大鼠经心脏抽血后迅速处死取肾,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分别检测各时点肾组织HSP70、HSP27和HO-1的mRNA和蛋白表达,测定T3时血清肌酐(creatinine,Cr)和尿素氮(urea nitrogen,BUN)浓度、肾组织丙二醛(methylene dioxyamphetamine,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、肾组织核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达和血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)浓度,光镜下观察肾组织病理学结果. 结果 S组HSP70、HSP27和HO-1的mRNA有微量表达,蛋白几乎无表达,其余组在To时开始表达,逐渐升高,T3时达高峰,随后逐渐下降.与S组比较,其余组各时点HSP70、HSP27和HO-1的mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),IPo组较I/R组T2～5时HSP70、HSP27和HO-1的mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),Q+IPo组较IPo组T2～5时HSP70、HSP27和HO-1的mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05).T3时血清Cr、BUN和TNF-α浓度I/R组分别为(102±5) μmol/L、(25.7±3.9) mmol/L、(2.29±0.18) μg/L,IPo组分别为(64±5)μmol/L、(11.3±3.0) mmol/L、(1.76±0.13)μg/L,Q+IPo组分别为(101±6)μmol/L、(26.5±4.5) mmol/L、(2.31±0.17) μg/L,均高于S组(46±6) μmol/L、(5.1±1.9) mmol/L和(1.13±0.14) μg/L(P＜0.05),IPo组三者浓度较I/R组降低(P＜0.05),Q+IPo组较IPo组升高(P＜0.05).T3时MDA含量I/R组(2.20±0.23) nmol/mgprot、IPo组(1.35±0.13) nmol/mgprot和Q+IPo组(2.25±0.16) nmol/mgprot较S组(1.02±0.19) nmol/mgprot升高(P＜0.05),SOD活性I/R组(104±6) U/mgprot、IPo组(124±4) U/mgprot和Q+IPo组(106±5) U/mgprot较S组(147±6) U/mgprot 降低(P＜0.05),IPo组与I/R组比较MDA含量降低和SOD活性升高(P＜0.05),Q+Ipo组与IPo组比较MDA含量升高和SOD活性降低(P＜0.05),肾组织NF-κB表达I/R组、IPo组和Q+IPo组较S组增高,IPo组较I/R组表达降低,Q+IPo组较IPo组表达增高(P＜0.05).I/R组与Q+Ipo组相比,各指标差异无统计学意义(P＞0.05).与S组比较,其余3组有程度不等的肾组织病理学损伤,IPo组损伤较I/R组减轻,Q+IPo组损伤程度与I/R组相似. 结论 IPo上调了HSP70、HSP27和HO-1的表达；HSP高表达参与了肾IPo减轻肾I/RI的过程.

关键词：缺血后处理、缺血/再灌注损伤、肾、热休克蛋白

所属期刊栏目：33

分类号：R614(外科手术学)

在线出版日期：2012-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：236-240,250