异氟烷对原代培养的缺氧/复氧损伤心肌细胞活力及线粒体通透性转换的影响

摘要：

目的 在原代培养SD乳鼠心肌细胞上观察异氟烷(isoflurane,Iso)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤心肌细胞活力及线粒体通透性转换(mitochondrial permeability transition,MPT)的影响. 方法 1 d～3 d龄SD乳鼠心肌细胞原代培养48 h后,建立H/R模型.将培养细胞按孔随机分为5组(n=6),在缺氧期予Iso和苍术苷(atractyloside,Atra)处理:①Normal组:在37℃的CO2培养箱中孵育细胞5 h(95%空气+5%CO2);②H/R组:缺氧(95% N2+5% CO2)3 h,复氧(95%空气+5% CO2)2 h;③Atra组:缺氧3 h,缺氧期给予20μ的Atra,复氧2h;④Iso0.4组:缺氧3 h,缺氧期给予0.4mmol/L Iso,复氧2h;⑤Atra+Iso0.4组:缺氧3 h,缺氧期给予0.4mmol/L Iso和20 μmol/L Atra,复氧2 h.复氧50min后,以Calcein-AM染色心肌细胞,激光共聚焦显微镜观察细胞内线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)的开放;复氧2 h后,MTT法测定心肌细胞活力.结果 复氧2 h后,Normal组、H/R组、Atra组、Iso0.4组、Atra+Iso0.4组吸光度分别为0.442±0.010、0.417±0.006、0.413±0.007、0.462±0.011、0.452±0.008,Normsl组、Iso0.4组、Atra+Iso0.4组明显高于H/R组、Atra组(P<0.01);H/R组吸光度与Atra组差异无统计学意义(P>0.05).复氧50 min后,Normal组、Iso0.4组、Atra+Iso0.4组Calcein保留在线粒体内,胞浆荧光强度较弱;H/R组、Atra组Calcein从线粒体释放到胞浆,胞浆荧光强度较强. 结论 ①缺氧期Iso处理可以明显抑制心肌细胞MPTP开放,减轻缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)引起的心肌细胞损伤,保存细胞活力;②缺氧期给予Atra不能逆转Iso的心肌保护作用.

关键词：异氟烷、缺氧/复氧损伤、心肌细胞、线粒体通透性转换

所属期刊栏目：31

分类号：R9(药学)

资助基金：国家自然科学基金30571782

在线出版日期：2010-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：391-393,476