PBMC中TLR1、TLR2、TLR6在卵巢癌微环境中的作用研究

摘要：

目的 观察卵巢癌患者外周血单个核细胞(PBMC)与卵巢癌细胞共生长环境中,PBMC中Toll样受体(TLR)信号通路活化情况及前炎症细胞因子表达水平,研究TLR1、TLR2及TLR6在卵巢癌发生发展中的可能机制.方法 采用密度梯度离心法分离PBMC,利用PBMC和卵巢癌细胞系SK-OV-3共培养体系及抗TLR1、TLR2、TLR6抗体中和实验,RT-PCR法检测细胞中前炎症细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达水平;利用免疫印迹试验检测MyD88、TRAF6、TANK、核因子(NF)-κB和P-NF-κB的表达水平.结果 卵巢癌患者PBMC+SK-OV-3Transwell共培养组较PBMC单独培养组,TLR信号通路蛋白MyD88、TRAF6、TANK及P-NF-κB表达上调,IL-1β、IL-6及IL-8前炎症细胞因子的mRNA表达水平明显增加(Fold=1.74,Fold=1.92,Fold=1.65,P＜0.05),而TNFa mRNA表达水平无明显改变;与PBMC单独培养组比较,良性疾病患者及健康对照者IL 1β mRNA表达水平明显下调(Fold=0.71,P＜0.05;Fold=0.72,P＜0.05),TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA及TLR信号通路蛋白MyD88、TRAF6、TANK及P-NF-κB均无明显改变.抗体中和实验显示,卵巢癌患者PBMC+SK-OV-3+Anti-hTLR1-IgG Transwell共培养组、PBMC+ SK-OV-3+Anti-hTLR2-IgG Transwell共培养组、PBMC+SK-OV-3+Anti-hTLR6-IgG Transwell共培养组中前炎症细胞因子IL1β3(Fold=0.16,Fold=0.31,Fold=0.29,P＜0.05)、IL 6(Fold=0.14,Fold=0.20,Fold=0.28,P＜0.05) mRNA表达水平较PBMC+ SK-OV-3 Transwell共培养组明显下调.结论 卵巢癌生长微环境中,TLR1/TLR2/TLR6介导的信号通路活化是诱导卵巢癌患者PBMC中前炎症细胞因子表达上调的主要途径,在卵巢癌的发生、发展中发挥一定作用.

关键词：卵巢癌、Toll样受体、外周血单个核细胞、肿瘤微环境

所属期刊栏目：39

分类号：Q786;R734.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81371894,81272324;国家临床检验重点专科建设项目基金;江苏高校优势学科建设工程基金;江苏省实验诊断学重点实验室基金项目XK201114;2017年泰州市科技支撑计划社会发展项目SSF20170218;南通大学校级自然科学类科研基金项目16ZY36;泰州市人民医院院级课题ZL201613

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：537-542