HBV-DNA 定量检测核酸提取过程中影响因素的探讨

摘要：

目的：探讨浓缩液剂量、沉淀混匀方式和裂解煮沸时间等前处理因素对实时荧光定量 PCR法检测乙型肝炎病毒DNA（HBV‐DNA）的影响。方法在浓缩液分别为90、95、105、110μL ；混匀方式分别为：漩涡混匀15 s组和30 s组，56℃预热120 s再漩涡混匀15 s组和56℃预热180 s再漩涡混匀15 s组；裂解煮沸时间分别为：6，8，12，14 min等条件下对80例自配的低值质控品，浓度在103～104 IU／mL进行测定，并与标准操作即浓缩液100μL ，镊子敲打混匀15 s ，裂解煮沸时间10 min比较。结果漩涡混匀15 s组和56℃预热180 s再漩涡混匀15 s与标准组比较差异有统计学意义（P＜0．05）；煮沸裂解时间6 min组与10 min组间比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论在一定范围内适当改变浓缩液剂量、混匀方式和煮沸裂解时间，不会影响检测结果。但经过一定时间预热处理后再振荡混匀的方式更容易使沉淀混匀和核酸的释放。

关键词：聚合酶链反应、浓缩液、振荡时间、煮沸时间

分类号：TQ4;R28

在线出版日期：2015-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：2156-2157