临床治疗用人骨髓间充质干细胞保存条件的研究

摘要：

目的：探讨不同输注液、保存时间及温度对临床治疗用人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）存活率、表型及增殖能力等状况的影响。方法采用密度梯度离心法从人骨髓分离培养hBMSCs，流式细胞术检测细胞表型，并进行成骨、成脂等多向分化能力鉴定。在4℃和25℃条件下，将培养的第3代hBMSCs保存在3种临床常用输注液（9 g/L氯化钠注射液、5％人血清清蛋白氯化钠注射液、50 g/L葡萄糖氯化钠注射液）中，检测hBMSCs在不同时间点（0．5、1．0、2．0、4．0、6．0 h）的细胞存活率、细胞表型和存活细胞的增殖能力。结果 hBMSCs间充质干细胞形态为均一的长梭形，表达CD29、CD105，不表达CD34。成脂诱导2周，油红O染色，可见脂滴为红色。成骨诱导3周，茜素红S染色可见大量橘红色钙结节。4℃和25℃条件下，保存不同时间后，5％人血清清蛋白氯化钠注射液组细胞存活率和增殖能力均高于其余2组。同一组细胞4℃条件下保存不同时间后的增殖能力强于25℃条件下保存的细胞。不同输注液、保存温度及保存时间对细胞表型没有显著影响。结论4℃条件下，将间充质干细胞保存在5％人血清清蛋白氯化钠注射液中0．5 h内回输对细胞活力影响最小。

关键词：间充质干细胞、存活率、增殖能力

分类号：R77;R73

资助基金：中山市科技计划重大项目20113A001。

在线出版日期：2014-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1542-1544