人β干扰素基因定点突变及在sf9细胞中的表达和活性研究

摘要：

目的 研究人β干扰素突变体在杆状表达系统中的高效表达,为新型基因药物的研制提供可行性.方法 采用PCR定点突变技术构建人干扰素bS17突变基因,克隆到pFastBacTM HT B上,获得重组转移载体pFastBac-IFNβS17.将pFastBac-IFNβS17转化入DH10BacTM细胞,得到Bacmid-IFNβS17.将Baemid-IFNβS17转染sf9细胞,筛选到重组病毒Bac-IFNβS17.将Bac-IFNβS17感染sf9细胞进行表达.结果 Southern-blot证明IFNβS17已插入重组病毒中(3.9 kb左右的杂交带);SDS-PAGE、蛋白质印迹证明IFNβS17在sf9细胞中得到了表达.实验表明sf9细胞中120 h的表达产物干扰素活性最高,为2.62×105 IU/mL.结论 突变基因在sf9细胞得到了高效表达,且表达的重组蛋白具有IFN的生物活性.

关键词：干扰素类、细胞、基因表达、突变

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1096-1098